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微量分光光度計選購指南

[2011/8/31]

　　自從03年Nanodrop推出首款超微量分光光度計，立即受到全球各分子生物學實驗室的一致追捧和好評。僅需0.5-1ul的樣品體積，對于分子生物學實驗來說，不僅意味著大大減少檢測損耗的樣品，也因為檢測光徑減小而減少了對高濃度樣品如核酸或蛋白進行梯度稀釋的需求，實在太方便。

　　近期的超微量分光光度計市場可真是熱鬧，各大品牌如NanoDrop、BioTek、島津等，都爭相推出了最新力作。讓人欣喜的是，我們還看到了可與大品牌媲美的國產(chǎn)分光光度計，這說明國內(nèi)的儀器市場也在不斷地創(chuàng)新。因此，如何選擇一臺合適的微量分光光度計顯的尤為重要。

　　分光光度計作為實驗室中最常用的儀器之一，從低端到高端，五花八門，大家在選擇時可能有些無所適從。而只有從實驗室的實際需要出發(fā)，才能挑選出最合適的儀器。

　、倌銈儗嶒炇业某Ｒ(guī)應用有哪些?未來會增加或改變嗎?

　、谀阈枰獪y量的樣品體積范圍?如果它變化很大，你需要著重考慮分光光度計的樣品量和靈活性。

　、勰闶欠裥枰瑫r測量多個樣品?

　　④你需要什么樣的靈敏度?對于低濃度樣品，3-5 nm的帶寬比窄帶寬(1 nm)儀器的一致性更好。

　、萦卸嗌偃藭灿眠@一臺分光光度計?如果多人共用，預設程序可能會比較方便。

　　有一些硬性指標，在選購時不得不看。分光光度計的波長范圍是選購時要考慮的重要因素之一。在生物學實驗中，一臺覆蓋紫外光和可見光的分光光度計是不可缺少的。

　　分光光度計的帶寬(bandwidth)很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度。一種嚴格帶寬使得儀器能對復雜的混合物進行高分辨率的吸光測量。對于定量分析而言，3-5nm比較合適？勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實驗需要，當然，價格也更高。

　　在檢測器方面，CCD陣列更為普及。它具有非常高的量子效率、噪聲比光電二極管陣列低100倍，不僅光利用率得到改善，信噪比也得以提高。另外，CCD 陣列系統(tǒng)采用模塊化處理，使儀器在穩(wěn)定性方面更優(yōu)于如光電倍增管(PMTs)等單點真空管檢測器。

　　樣品量也是重要的考量因素。以前的比色皿，動輒50 ul，對于珍貴樣品來說那可真是大出血。因此現(xiàn)在面向分子生物學的分光光度計都趨向于微量化了(揮發(fā)性樣品不宜)。近期推出的幾款分光光度計，都無需比色皿，將樣品滴在特殊的表面上即可測量，所需的樣品量在2 ul或以下。這種方法檢測范圍超寬，無需對樣品進行稀釋。稀釋樣品不僅耽誤時間，在準確性上也是大打折扣。