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薄層色譜儀操作方法

[2012/3/20]

　　(1)薄層板制備除另有規(guī)定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,

　　去除表面的氣泡后，倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布(厚度為0.2～

　　0.3mm)，取下涂好薄層的玻板，置水平臺(tái)上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘，即置

　　有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過(guò)透射光和反射光檢視)。

　　(2)點(diǎn)樣除另有規(guī)定外，用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底

　　邊2.0cm，樣點(diǎn)直徑及點(diǎn)間距離同紙色譜法,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為

　　宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

　　(3)展開(kāi)展開(kāi)缸如需預(yù)先用展開(kāi)劑飽和，可在缸中加入足夠量的展開(kāi)劑，并在壁

　　上貼二條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開(kāi)劑中，密封缸頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡或

　　按正文規(guī)定操作。

　　將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)缸的展開(kāi)劑中,浸入展開(kāi)劑的深度為距薄層板底邊0.5

　　～1.0cm(切勿將樣點(diǎn)浸入展開(kāi)劑中),密封缸蓋,待展開(kāi)至規(guī)定距離(一般為10～15cm),

　　取出薄層板，晾干，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測(cè)。

　　(4)如需用薄層掃描儀對(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描檢出，或直接在薄層上對(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描定量，則可用薄層掃描法。

　　薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及使用說(shuō)明，

　　結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長(zhǎng)或單波長(zhǎng)掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果

　　的因素很多，故應(yīng)在保證供試品的斑點(diǎn)在一定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下，將供試品與

　　對(duì)照品在同一塊薄層上展開(kāi)后掃描，進(jìn)行比較并計(jì)算定量，以減少誤差。各種供試品，

　　只有得到分離度和重現(xiàn)性好的薄層色譜，才能獲得滿意的結(jié)果。

　　斑點(diǎn)洗脫后測(cè)定法

　　薄層經(jīng)展開(kāi)后用刮刀或捕集器將斑點(diǎn)的吸附劑捕集后，再用適當(dāng)有機(jī)溶劑洗脫，然后用可見(jiàn)、紫外分光光度法、熒光分光光度法測(cè)定含量。

　　但樣品斑點(diǎn)不能?chē)婏@色劑，以免影響不測(cè)定，斑點(diǎn)位置的確定方法。

　　樣品在紫外線下發(fā)射熒光的，可在紫外燈下觀察斑點(diǎn)并用針劃去斑點(diǎn)位置。

　　用碘蒸汽顯色，在組分處理出棕色斑點(diǎn)(碘吸附后會(huì)揮發(fā))。

　　用標(biāo)準(zhǔn)物對(duì)照，將標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)于邊上一測(cè)顯色時(shí)，蓋住樣品，定出斑點(diǎn)位置。