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高效液相色譜法及其與氣相色譜法的區(qū)別

[2012/3/31]

　　高效液相色譜法：

　　特指一種用液體為流動(dòng)相的色譜分離分析方法。它在經(jīng)典色譜理論的基礎(chǔ)上，采用了高壓泵、化學(xué)

　　鍵合固定相高效分離柱、高靈敏專(zhuān)用檢測(cè)器等新實(shí)

　　驗(yàn)技術(shù)建立的一種液相色譜分析法。

　　高壓：150-350*105Pa

　　高效：大于30000塔板/米

　　高靈敏：10-9g(紫外檢測(cè))、10-11g(熒光檢測(cè))

　　液相色譜儀與氣相色譜儀的區(qū)別：

　　1.分析對(duì)象的區(qū)別

　　GC：適于能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點(diǎn)較

　　低的樣品;但對(duì)高沸點(diǎn)、揮發(fā)性差、

　　熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣

　　品，尤其對(duì)大多數(shù)生化樣品不可檢測(cè)

　　占有機(jī)物的20%

　　HPLC：適于溶解后能制成溶液的樣品(包括

　　有機(jī)介質(zhì)溶液)，不受樣品揮發(fā)性和

　　熱穩(wěn)定性的限制，對(duì)分子量大、難

　　氣化、熱穩(wěn)定性差的生化樣品及高分

　　子和離子型樣品均可檢測(cè)

　　用途廣泛，占有機(jī)物的80%

　　2.流動(dòng)相差別的區(qū)別

　　GC：流動(dòng)相為惰性，氣體組分與流動(dòng)相無(wú)親合作用

　　力，只與固定相有相互作用。

　　HPLC：流動(dòng)相為液體，流動(dòng)相與組分間有親合作用

　　力，能提高柱的選擇性、改善分離度，對(duì)分離起

　　正向作用。且流動(dòng)相種類(lèi)較多，選擇余地廣，改

　　變流動(dòng)相極性和pH值也對(duì)分離起到調(diào)控作用，當(dāng)

　　選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相

　　也可以增大分離選擇性。

　　3.操作條件差別

　　GC：加溫操作

　　HPLC：室溫;高壓(液體粘度大，峰展寬小)