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二氧化碳培養(yǎng)箱各個控制方面的技術(shù)

[2012/6/21]

　　二氧化碳培養(yǎng)箱各個控制方面的技術(shù)

　　高溫干熱空氣滅菌是到現(xiàn)在為止世界公認的最管用的滅菌技術(shù)，能徹底消泯全部微有生命的物質(zhì)污染源(涵蓋耐高溫的芽孢桿菌);濕熱滅菌一般用于高壓蒸汽滅菌中，比較少用在CO2培養(yǎng)箱上，濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法，煮沸的水溫普通至少需為100℃，球菌蕃息體煮沸5分鐘被殺害，但芽胞常需煮沸2鐘頭以上才可被殺害;紫外燈映射法的管用性受眾多因素影響，如遮攔、時間、強度、映射距離，濕潤程度等，滅菌效果很保不住證;消毒劑揩拭法是對外表滅菌的辦法，適應(yīng)于平整的外表按實際情況驗臺面，而箱體內(nèi)里預(yù)設(shè)的死角兒、各種部件因沒有辦法揩拭等因素造成滅菌效果也很有限，并且含氯、碘的消毒劑對于不銹鋼有腐蝕效用，不可以對不銹鋼箱體施行揩拭滅

　　到現(xiàn)在為止，二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術(shù)主要有干熱、濕熱、紫外燈映射、消毒劑揩拭等。

　　非同種細胞：即細胞交錯污染，因為細胞培育操作時各細胞株所需的器具材料和溶液沒有嚴明分開，往往會使一種細胞被另一種細胞污染。到現(xiàn)在為止，天底下已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染，以致很多實驗宣布失效。

　　支原體：支原體污染后，由于他們不會使細胞失去生命可以與細胞長時期并存，營養(yǎng)物質(zhì)普通不發(fā)生混濁，細胞無表面化變動，外觀上給人以正常感受，其實細胞已經(jīng)遭受各方面潛伏影響，如引動細胞變型，影響DNA合成，制約細胞成長等，往往被大部分數(shù)實驗者不重視。

　　真菌(霉菌和釀母菌菌)：真菌成長的比較慢，不象球菌那末容易被發(fā)覺，不過一朝發(fā)覺有它的存在細胞就被污染了;到現(xiàn)在為止沒有好的制約辦法，涵蓋如今常用的兩性霉素，一朝污染容易反反復(fù)復(fù)爆發(fā)，特別胞子很難殺滅。

　　病毒：因為病毒寄生保存生命，爆發(fā)后盡量加快和正常細胞隔離，拋棄處置，相對來說容易處置，對操筆者要挾較大;盡管病毒污染的細胞不影響原代培育，但出產(chǎn)疫苗是不安全的。因為這個，潛伏病毒是細胞數(shù)量多出產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制劑制造中的困難的問題。

　　球菌：球菌污染后，營養(yǎng)物質(zhì)1-2天便會變色，對細胞成長影響表面化，應(yīng)迅疾將污染細胞與其他細胞系隔離，滅菌后拋棄，還要用實驗室消毒劑消毒培育盛器和超凈臺。

　　對于細胞來說，十分理想的培育背景一樣也適應(yīng)這些個污染物的保存生命，培育箱本身是不會鑒別的，而細胞培育中大多時間里細胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi)，因為這個箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌十分關(guān)鍵!

　　二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源：球菌、真菌(霉菌和釀母菌菌)、病毒、支原體、非同種細胞。

　　因為這個，以上污染一朝發(fā)生，細胞最終基本只能拋棄，實驗沒有辦法挽救，對于很多抽樣艱難的實驗虧損沒有辦法改變!

　　在有生命的物質(zhì)活體內(nèi)，有生命的物質(zhì)體有自身的抵抗力系統(tǒng)盡力照顧細胞或團體，不過在體外培育時，沒有不論什么盡力照顧自個兒的抵抗力屏障。對于碳酸氣培育箱的基本參變量溫度、CO2和濕潤程度，大部分數(shù)培育箱都能滿意研討實驗的需求。不過，針對培育過程中面對的各種污染源，各品牌二氧化碳培養(yǎng)箱的扼制形式和效果不盡相同，因為這個細胞體外培育中最大的要挾其實是污染問題。

　　二氧化碳培養(yǎng)箱是經(jīng)過在培育箱箱體內(nèi)摹擬形成一個大致相似細胞/團體在有生命的物質(zhì)體內(nèi)的成長背景如牢穩(wěn)的溫度(37°C)、牢穩(wěn)的CO2水準(5%)、永恒固定的酸堿度(pH值：7.2-7.4)、較高的相對濕潤程度(95%)，來對細胞/團體施行體外培綿羊裝置。廣泛應(yīng)用于細胞、團體培育和某些特別微有生命的物質(zhì)的培育，常見于細胞動力學(xué)研討、哺乳動物細胞分泌物的使聚在一起、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研討和出產(chǎn)、培育雜交瘤細胞出產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細胞、團體工程、藥物用篩子選等研討領(lǐng)域。