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生物實(shí)驗(yàn)室有毒試劑危害及防護(hù)

[2013/1/7]

  常用的生物試劑通常情況下都帶有一定的毒性,因此在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中應(yīng)注意做好防護(hù)措施,以免危害人身安全。

  1EB:(Ethidiumbromide溴化乙錠)

  溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑,用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA。溴化乙錠用標(biāo)準(zhǔn)302nm紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號(hào),觀察瓊脂糖凝膠中DNA最常用的方法是利用熒光染料溴化乙錠進(jìn)行染色,溴化乙錠含有一個(gè)可以嵌入DNA堆積堿基之間的一個(gè)三環(huán)平面基團(tuán)。它與DNA的結(jié)合幾乎沒(méi)有堿基序列特異性。在高離子強(qiáng)度的飽和溶液中,大約每2.5個(gè)堿基插入一個(gè)溴化乙錠分子。當(dāng)染料分子插入后,其平面基團(tuán)與螺旋的軸線垂直并通過(guò)范范范范德華力德華力德華力德華力與上下堿基相互作用。這個(gè)基團(tuán)的固定位置及其與堿基的密切接近,導(dǎo)致與DNA結(jié)合的染料呈現(xiàn)熒光,其熒光產(chǎn)率比游離溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm處的紫外輻射并傳遞給染料,而被結(jié)合的染料本身吸收302nm和366nm的光輻射。這兩種情況下,被吸收的能量在可見(jiàn)光譜紅橙區(qū)的590nm處重新發(fā)射出來(lái)。由于溴化乙錠溴化乙錠溴化乙錠溴化乙錠-DNA復(fù)合物的熒光產(chǎn)率比沒(méi)有結(jié)合復(fù)合物的熒光產(chǎn)率比沒(méi)有結(jié)合復(fù)合物的熒光產(chǎn)率比沒(méi)有結(jié)合復(fù)合物的熒光產(chǎn)率比沒(méi)有結(jié)合DNA的染料高出的染料高出的染料高出的染料高出20-30倍倍倍倍,所以當(dāng)凝膠中含有游離的溴化乙(0.5ug/ml)時(shí),可以檢測(cè)到少至10ng的NDA條帶。

  溴化乙錠可以嵌入堿基分子中,導(dǎo)致錯(cuò)配導(dǎo)致錯(cuò)配導(dǎo)致錯(cuò)配導(dǎo)致錯(cuò)配。溴化乙錠是強(qiáng)誘變劑強(qiáng)誘變劑強(qiáng)誘變劑強(qiáng)誘變劑,具有高致癌性!會(huì)在60-70度是蒸發(fā)度是蒸發(fā)度是蒸發(fā)度是蒸發(fā),(所以最好不要在膠太熱的時(shí)候加,或者應(yīng)該加到液體里,0.5ug/ml,染色半小時(shí),)(當(dāng)EB加得過(guò)多時(shí),也可以在室溫用水將已染色的凝膠浸泡20min以降低未結(jié)合的EB引起的背景熒光)

  溴化乙錠溶液的凈化處理:由于溴化乙錠具有一定的毒性,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,應(yīng)對(duì)含EB的溶液進(jìn)行凈化處理再行棄置,以避免污染環(huán)境和危害人體健康。

  (1)對(duì)于EB含量大于0.5mg/ml的溶液,可如下處理:

 、賹B溶液用水稀釋至濃度低于0.5mg/ml;

 、诩尤胍槐扼w積的0.5mol/LKMnO4,混勻,再加入等量的25mol/LHCl,混勻,置室溫?cái)?shù)小時(shí);

  ③加入一倍體積的2.5mol/LNaOH,混勻并廢棄。

  (2)EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下處理:

 、侔1mg/ml的量加入活性炭,不時(shí)輕搖混勻,室溫放置1小時(shí);

 、谟脼V紙過(guò)濾并將活性碳與濾紙密封后丟棄

  2丙烯酰胺--

  強(qiáng)烈的神經(jīng)毒劑并可通過(guò)皮膚吸收(其效應(yīng)是累加的),避免吸入粉末。當(dāng)稱(chēng)量丙稀酰胺粉和亞甲雙丙稀酰胺時(shí),要戴合適的手套和防護(hù)面具,在通風(fēng)廚里操作。大量的動(dòng)物試驗(yàn)研究表明丙烯酰胺主要引起神經(jīng)毒性;此外,為生殖、發(fā)育毒性。PS:油炸油炸油炸油炸食品中也含有這種物質(zhì)。人們認(rèn)為多聚丙烯酰胺是無(wú)毒的,但亦應(yīng)小心操作,因?yàn)榭赡芎猩倭课淳酆系谋0贰僦械榷拘晕镔|(zhì)?赏ㄟ^(guò)皮膚吸收及呼吸道進(jìn)入人體,因此,在搬運(yùn)和使用中必須穿戴好防護(hù)用具,如防毒服,防毒口罩及防毒手套等。丙烯酰胺的危害主要是引起神經(jīng)毒性,同時(shí)還有生殖、發(fā)育毒性發(fā)育毒性發(fā)育毒性發(fā)育毒性。神經(jīng)毒性作用表現(xiàn)為周?chē)窠?jīng)退行性變化和腦中涉及學(xué)習(xí)、記憶和其他認(rèn)知功能部位的退行性變化,試驗(yàn)還顯示丙烯酰胺是一種可能致癌物,職業(yè)接觸人群的流行病學(xué)觀察表明,長(zhǎng)期低劑量接觸丙烯酰胺會(huì)出現(xiàn)嗜睡、情緒和記憶改變、幻覺(jué)和震顫等癥狀,伴隨末梢神經(jīng)病如手套樣感覺(jué)、出汗和肌肉無(wú)力。累積毒性,不容易排毒。

  具備以下任何一項(xiàng)者,可列為慢性丙烯酰胺中毒觀察對(duì)象:

  a.接觸丙烯酰胺的局部皮膚局部皮膚局部皮膚局部皮膚出現(xiàn)多汗、濕冷、脫皮脫皮脫皮脫皮、紅斑;

  b.出現(xiàn)肢端麻木、刺痛、下肢乏力、嗜睡等癥狀;

  c.神經(jīng)-肌電圖顯示有可疑神經(jīng)源性損害。

  治療原則

  可用B族維生素族維生素族維生素族維生素、能量合劑,并輔以體療、理療及對(duì)癥治療。重度中毒者應(yīng)同時(shí)加強(qiáng)支持療法。

  3.DEPC--焦碳酸二乙酯

  :聞起來(lái)香香甜甜的,可是害人不眨眼!一種強(qiáng)有力的蛋白強(qiáng)有力的蛋白強(qiáng)有力的蛋白強(qiáng)有力的蛋白質(zhì)變性劑,而且懷疑是致癌劑.開(kāi)瓶時(shí)將瓶子遠(yuǎn)離你,內(nèi)壓可導(dǎo)致濺潑.操作時(shí)戴合適的手套,穿工作服,并在化學(xué)通風(fēng)櫥里進(jìn)行。強(qiáng)烈但不徹底的RNA酶抑制劑。DEPC毒性并不是很強(qiáng),但吸入的毒性是最強(qiáng)的吸入的毒性是最強(qiáng)的吸入的毒性是最強(qiáng)的吸入的毒性是最強(qiáng)的,使用時(shí)戴口罩。不小心占到手上注意立即沖洗立即沖洗立即沖洗立即沖洗。DEPC即二乙基焦碳酸酯(diethylprocarbonate),可滅活各種蛋白質(zhì)可滅活各種蛋白質(zhì)可滅活各種蛋白質(zhì)可滅活各種蛋白質(zhì),是RNA酶的強(qiáng)抑制劑酶的強(qiáng)抑制劑酶的強(qiáng)抑制劑酶的強(qiáng)抑制劑。

  DEPC是一種潛在的致癌物質(zhì),在操作中應(yīng)盡量在通風(fēng)的條件下進(jìn)行,并避免接觸皮膚。DEPC毒性并不是很強(qiáng),但吸入的毒性是最強(qiáng)的,使用時(shí)戴口罩。不小心占到手上注意立即沖洗,RNaseAwayTM試劑可以替代DEPC,操作簡(jiǎn)單,價(jià)格低,且無(wú)毒性。只需將RNaseAwayTM直接倒在玻璃器皿和塑料器皿的表面,浸泡后用水沖洗去除,即可以快速去除器皿表面的RNase,并且不會(huì)殘留而干擾后繼實(shí)驗(yàn)。

  4.雙丙烯酰胺:強(qiáng)烈的神經(jīng)毒劑并可通過(guò)皮膚吸收(其效應(yīng)是累加的)。避免吸入粉末,當(dāng)稱(chēng)重粉末狀的丙烯酰胺和亞甲丙烯酰胺時(shí)要戴手套和防護(hù)面具。

  5.N,-四甲基乙二胺(TEMED):

  對(duì)黏膜、上呼吸道、眼睛和皮膚的組織有極大的破壞作用。吸入和致命。長(zhǎng)時(shí)間接觸可引起嚴(yán)重的刺激和灼傷。戴合適的手套、安全眼鏡和實(shí)驗(yàn)工作服,僅在化學(xué)通風(fēng)廚里使用。操作過(guò)后要徹操作過(guò)后要徹操作過(guò)后要徹操作過(guò)后要徹底的洗手底的洗手底的洗手底的洗手。易燃,切勿靠近熱、火花和明火。強(qiáng)神經(jīng)毒性,防止誤吸防止誤吸防止誤吸防止誤吸。

  6.十二烷基磺酸鈉(SDS):

  有毒,是一種刺激物,并造成對(duì)眼睛的嚴(yán)重?fù)p傷的危險(xiǎn),可因吸入、咽下或皮膚吸收而危害健康。戴合適的手套和安全眼鏡。勿吸入其粉末。

  7過(guò)硫酸銨[(NH4)2S2O8]

  對(duì)黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性。吸入可致命。操作時(shí)戴合適的手套、安全眼鏡和防護(hù)服。始終在通風(fēng)櫥里操作,操作完后徹底洗手。

  8.甘氨酸:

  可因吸入、咽下或皮膚吸收而危害健康。操作時(shí)戴合適的手套和安全眼鏡。不要吸入其粉末。

  9.二硫蘇糖醇(DTT):是一種很強(qiáng)的還原劑,散發(fā)一種難聞的氣味難聞的氣味難聞的氣味難聞的氣味,可因吸入、咽下或皮膚吸收而危害健康。當(dāng)使用固體和高濃度貯存液時(shí),要戴合適的手套和安全眼鏡。

  10.β-巰基乙醇:

  如果吸入或通過(guò)皮膚吸收可以致命,如果咽下會(huì)是有害的。高濃度的巰基乙醇高濃度的巰基乙醇高濃度的巰基乙醇高濃度的巰基乙醇對(duì)黏膜、上呼吸道、皮膚和眼睛有非常嚴(yán)重的損傷作用。戴合適的手套和安全眼鏡,始終在化學(xué)通風(fēng)廚內(nèi)進(jìn)行操作?芍旅,對(duì)呼吸道、皮膚和眼睛有傷害

  11.氯仿(CHCl3):

  對(duì)皮膚、眼睛、黏膜和呼吸道有刺激作用。它是一種致癌劑致癌劑致癌劑致癌劑,可損害肝和腎。它也易揮發(fā),避免吸入揮發(fā)的氣體。操作時(shí)戴合適的手套和安全眼鏡并始終在化學(xué)通風(fēng)櫥里進(jìn)行。

  12.Tris:

  可因吸入、咽下或皮膚吸收咽下或皮膚吸收咽下或皮膚吸收咽下或皮膚吸收而受害。在化學(xué)通風(fēng)廚內(nèi)使用。

  13.考馬斯亮藍(lán):

  可因吸入、咽下或皮膚吸收而受到傷害。操作時(shí)戴合適的手套和安全眼鏡。