怀化焕毕租售有限公司

MTT溶液的配制方法

[2013/1/23]

　　MTT溶液的配制方法

　　通常MTT濃度為5mg/ml。因此，可以稱取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液(PBS)或無酚紅的培養(yǎng)基中，用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細(xì)菌，放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包住。

　　需要注意的是，MTT法只能用來檢測細(xì)胞相對數(shù)和相對活力，但不能測定細(xì)胞絕對數(shù)。在用酶標(biāo)儀檢測結(jié)果的時(shí)候，為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的線性，MTT 吸光度最好在0-0.7 范圍內(nèi)。

　　MTT一般最好現(xiàn)用現(xiàn)配，過濾后4℃避光保存兩周內(nèi)有效，或配制成5mg/ml保存在-20度長期保存，避免反復(fù)凍融，最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分裝在EP管里，用的時(shí)候現(xiàn)配，直接往培養(yǎng)板中加，沒必要一下子配那么多,尤其當(dāng)MTT變?yōu)榛揖G色時(shí)就絕對不能再用了。

　　MTT有致癌性，用的時(shí)候小心，有條件最好帶那種透明的簿膜手套。配成的MTT需要無菌，MTT對菌很敏感;往96孔板加時(shí)不避光也沒有關(guān)系，畢竟時(shí)間較短，或者你不放心的時(shí)候可以把操作臺(tái)上的照明燈關(guān)掉。配制MTT時(shí)用用PBS溶解，也有人用生理鹽水配，60℃水浴助溶。

　　PBS配制方法：Nacl 8g、Kcl 0.2g、Na2HPO4 1.44g、KH2PO4 0.24g，調(diào)pH 7.4，定容1L。