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干貨!酶標(biāo)儀基本知識及其注意事項(xiàng)

[2019/7/12]

      酶標(biāo)儀(MicroplateReader)是對酶聯(lián)免疫檢測(EIA)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的,反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測抗體或抗原的濃度。


      酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中,特別在近幾年中,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應(yīng)用,使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣泛,同時促進(jìn)了生殖健康技術(shù)水平提高。


      目前國內(nèi)許多計(jì)生站系統(tǒng)開展了酶免檢測項(xiàng)目,如:乙肝五項(xiàng)、愛滋病檢測、優(yōu)生優(yōu)育系列檢測、激素檢測等。過去多數(shù)采用目測方法,報(bào)出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù)。例如:某弓形蟲檢測試劑盒中,臨界值規(guī)定為:陰性對照品的OD值×2.5,通過目測無法判斷標(biāo)本孔的反應(yīng)顏色是否超過臨界值。肉眼進(jìn)行兩孔之間的顏色比較可能還行,但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。


      國內(nèi)多家權(quán)威機(jī)構(gòu),如衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心和計(jì)劃生育系統(tǒng)等多次強(qiáng)調(diào)酶標(biāo)儀的重要性,并要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀,酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀,并提供酶標(biāo)儀測定的原始數(shù)據(jù),而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的項(xiàng)目往往是一些實(shí)質(zhì)性的感染和病變(如:肝炎、愛滋病、優(yōu)生優(yōu)育等),判讀更要求嚴(yán)謹(jǐn),由誤診引起的糾紛很難處理。另外,住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝、愛滋等EIA試劑檢測是避免因輸血引起感染引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段,正逐漸被許多單位所采用。


      酶標(biāo)儀的使用注意事項(xiàng)
  1、工作環(huán)境
      酶標(biāo)儀是一種精密的光學(xué)儀器,因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,還能夠延長其使用壽命。根據(jù)DINVDE0871條例,儀器應(yīng)放置在無磁場和干擾電壓的位置。依據(jù)DIN45635-19條例:


      儀器應(yīng)放置在低于40分貝的環(huán)境下。


      為延緩光學(xué)部件的老化,應(yīng)避免陽光直射。


      操作時環(huán)境溫度應(yīng)在15℃-40℃之間,環(huán)境濕度在15%-85%之間。


      操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。


      操作環(huán)境空氣清潔,避免水汽,煙塵。


      保持干燥、干凈、水平的工作臺面,以及足夠的操作空間。


  2、操作注意事項(xiàng)

      酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果,因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果,試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測判斷結(jié)果,操作過程隨意性較大,在使用酶標(biāo)儀后如果不能及時糾正操作習(xí)慣,會造成較大誤差。在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項(xiàng):


      使用加液器加液,加液頭不能混用。


      洗板要洗干凈。如果條件允許,使用洗板機(jī)洗板,避免交叉污染。


      嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作,反應(yīng)時間準(zhǔn)確。


      在測量過程中,請勿碰酶標(biāo)板,以防酶標(biāo)板傳送時擠傷操作人員的手。


      請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成后請洗手。


      如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害,請嚴(yán)格按照試 劑盒的操作說明,以防對操作人員造成損害。


      如果儀器接觸過污染性或傳染性物品,請進(jìn)行清洗和消毒。


      不要在測量過程中關(guān)閉電源。


      對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時修改參數(shù),以達(dá)到最佳效果。


      使用后蓋好防塵罩。