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生物顯微鏡相關(guān)參數(shù)

[2012/10/19]

  數(shù)值孔徑(NA)

  數(shù)值孔徑簡(jiǎn)寫(xiě)NA,數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù),是判斷兩者(尤其對(duì)物鏡而

  言)性能高低的重要標(biāo)志。其數(shù)值的大小,分別標(biāo)刻在物鏡和聚光鏡的外殼上。它是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率(n)和孔徑角(u)半數(shù)的正弦之乘積。用公式表示如下:NA=nsinu/2。它與分辨率成正比,與放大率成正比,與焦深成反比,NA值增大,視場(chǎng)寬度與工作距離都會(huì)相應(yīng)地變小。

  數(shù)值孔徑(NA) 分辨率

  分辨率

  顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清晰區(qū)分的兩個(gè)物點(diǎn)的最小間距,又稱(chēng)"鑒別率"。其計(jì)算公式是σ=λ/NA 式中σ為最小分辨距離;λ為光線的波長(zhǎng);NA為物鏡的數(shù)值孔徑。可見(jiàn)物鏡的分辨率是由物鏡的NA值與照明光源的波長(zhǎng)兩個(gè)因素決定。

  放大率和有效放大率

  經(jīng)過(guò)物鏡和目鏡的兩次放大,所以顯微鏡總的放大率是物鏡放大率和目鏡放大率的乘積,顯微鏡放大倍率的極限即有效放大倍率。

  焦深

  焦深為焦點(diǎn)深度的簡(jiǎn)稱(chēng),即在使用顯微鏡時(shí),當(dāng)焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)某一物體時(shí),不僅位于該點(diǎn)平面上的各點(diǎn)都可以看清楚,而且在此平面的上下一定厚度內(nèi),也能看得清楚,這個(gè)清楚部分的厚度就是焦深。焦深大, 可以看到被檢物體的全層,而焦深小,則只能看到被檢物體的一薄層.

  焦深 目鏡的視場(chǎng)

  視場(chǎng)直徑

  所看到的明亮的圓形范圍叫視場(chǎng),它的大小是由目鏡里的視場(chǎng)光闌決定的。視場(chǎng)直徑也稱(chēng)視場(chǎng)寬度,是指在顯微鏡下看到的圓形視場(chǎng)內(nèi)所能容納被檢物體的實(shí)際范圍。視場(chǎng)直徑愈大,愈便于觀察。

  視場(chǎng)直徑=目鏡視場(chǎng)數(shù)/物鏡倍率

  覆蓋差

  由于蓋玻片的厚度不標(biāo)準(zhǔn),光線從蓋玻片進(jìn)入空氣產(chǎn)生折射后的光路發(fā)生了改變,從而產(chǎn)生了相差,這就是覆蓋差.國(guó)際上規(guī)定,蓋玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度為0.17mm,許可范圍在0.16-0.18mm,在物鏡的制造上已將此厚度范圍的相差計(jì)算在內(nèi)。物鏡外殼上標(biāo)的0.17,即表明該物鏡所要求的蓋玻片的厚度。

  工作距離(WD)

  工作距離也叫物距,即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。