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生物化學實驗常用試劑的配制方法

[2012/12/14]

　　生物化學實驗常用試劑的配制方法

　　1、0.5mol/L氫氧化鈉溶液 □組份濃度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.準確稱取氫氧化鈉40g。 2.用去離子水溶解并稀釋至2L。

　　2、0.5mol/L鹽酸溶液 □組份濃度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.準確量取鹽酸83.4mL。 2.用去離子水稀釋至2L。

　　3、含 0.5mol/L氯化鈉的 0.5mol/L氫氧化鈉溶液 □組份濃度 0.5mol/L氯化鈉、0.5mol/L氫氧化鈉 □配制量 1L □配置方法 1.準確量取氯化鈉29.3g。 2.準確量取氫氧化鈉20g。 3.用去離子水稀釋至1L。 注意：此溶液供回收纖維素時使用。

　　4、0.2%葡萄糖標準溶液 □組份濃度 0.2% □配制量 1L □配置方法 1.稱取葡萄糖2.5g置于稱量瓶中，在70℃干燥2小時。 2.干燥器中冷卻至室溫，重復干燥，冷卻至恒重。 3.準確稱取葡萄糖2.000g。 4.用去離子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。

　　5、250μg/mL牛血清白蛋白標準液 □組份濃度 250μg/mL □配制量 2L □配置方法 1.準確稱取250mg標準牛血清白蛋白。 2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸緩沖液溶解并定容至1L。 3.4℃保存。

　　6、Folin試劑甲 □配置方法 1.稱取10g氫氧化鈉溶于400mL去離子水中，加入50g無水碳酸鈉，溶解，待用。2.稱取0.5g酒石酸鉀鈉，溶于80mL去離子水中，加入0.25g硫酸銅•5水，溶解。3.將1：2：去離子水按20：4：1的比例混合即可。 4. 4℃保存，可用一周。

　　7、Folin試劑乙 □配置方法 1.在500mL的磨口回流裝置內(nèi)加入鎢酸鈉•2水25.0359g， 鉬酸鈉•2水6.2526g，去離子水175mL，85%磷酸12.5mL， 濃鹽酸25mL，充分混合。 2.回流10小時，再加硫酸鋰37.5g，去離子水12.5mL及數(shù)滴溴。 3.然后開口沸騰15min，以驅除過量的溴，冷卻后定容到250mL。 4.于棕色瓶中保存，可使用多年 注意：上述制備地Folin試劑乙地貯備液濃度一般在2mol/L左 右，幾種操作方案都是把Folin試劑乙稀釋至1mol/L的 濃度作為應用液，我們這時是把貯備液于使用前稀釋18 倍，使之濃度為0.1mol/L略高。這種稀釋18倍后的Folin 試劑乙就是上文稱之為的“應用液”。Folin試劑乙貯備 液濃度的標定，一般是以酚酞為指示劑。用Folin試劑乙去滴定1mol/L左右的標準氫氧化鈉溶液，當溶液顏色由紅變?yōu)樽匣，再突然變成墨綠即為終點，如果用氫氧化鈉去滴定Folin試劑乙，終點不太好掌握，溶液地顏色是由淺黃變?yōu)闇\綠，再變?yōu)榛易仙珵榻K點。

　　8、DNS試劑 (3，5-二硝基水楊酸試劑) □配置方法 1.取3，5-二硝基水楊酸10g，加入2mol/L氫氧化鈉溶液200mL。2.將3，5-二硝基水楊酸溶解，然后加入酒石酸鉀鈉300g。 3. 待其完全溶解，用去離子水稀釋至2000mL，棕色瓶保存。

　　9、5%蔗糖溶液 □組份濃度 5% □配制量 1L □配置方法 稱取蔗糖50g，用去離子水溶解定容至1L。

　　10、0.1mol/L蔗糖溶液 □組份濃度 0.1mol/L □配制量 1L □配置方法 稱取蔗糖34.230g，用去離子水溶解并定容至1L。

　　11、20%乙酸溶液 □組份濃度 20% □配制量 1.2L □配置方法 量取冰乙酸300mL，用去離子水稀釋至1200mL。

　　12、30%(W/V)Acrylamide □組份濃度 30%(W/V)Acrylamide 0.05% □配制量 1L □配置方法 1.稱量下列試劑，置于1L燒杯中 Acrylamide 290g 、BIS 10g 2.向燒杯中加入約600mL的去離子水，充分攪拌溶解 3.加入去離子水將溶液定容至1L，用0.45μm濾膜濾去雜質。 4.于棕色瓶中4℃保存。 注意：丙稀銑胺具有很強的神經(jīng)毒性，并可通過皮膚吸收，其作用有積累性，配制時應戴手套等。聚丙烯酰胺無毒，但也應謹慎操作，因為有可能含有少量的未聚合成份。

　　13、40%(W/V)Acrylamide □組份濃度 40%(W/V)Acrylamide 0.05% □配制量 1L □配置方法 1.稱量下列試劑，置于1L燒杯中 Acrylamide 380g、BIS 20g 2.向燒杯中加入約600mL的去離子水，充分攪拌溶解 3.加入去離子水將溶液定容至1L，用0.45μm濾膜濾去雜質。 4.于棕色瓶中4℃保存。 注意：丙稀銑胺具有很強的神經(jīng)毒性，并可通過皮膚吸收， 其作用有積累性，配制時應戴手套等。聚丙烯酰胺無毒，但也應謹慎操作，因為有可能含有少量的未聚合成份。

　　14、10%(W/V)過硫酸銨 □組份濃度 10%(W/V)過硫酸銨 □配制量 10mL □配置方法 1.稱取1g過硫酸銨。 2.加入10mL的去離子水后攪拌溶解。 3.貯存于4℃。 注意：10%過硫酸胺溶液在4℃保存時間可使用2周左右，超過期限會失去催化作用。

　　15、考馬斯亮藍R-250染色液□組份濃度 0.1%(W/V)考馬斯亮藍R-250，25%(V/V)異丙醇， 10%(V/V)冰醋酸 □配制量 1L □配置方法 1.稱取1g考馬斯亮藍R-250，置于1L燒杯中。 2.量取250mL的異丙醇加入上述燒杯中，攪拌溶解。 3.加入100mL的冰乙醋酸，均勻攪拌。 4.加入650mL的去離子水，均勻攪拌。 5.用濾紙出去顆粒物質后，室溫保存。

　　16、考馬斯亮藍染色脫色液 □組份濃度 10%(V/V)醋酸，5%(V/V)乙醇 □配制量 1L □配置方法 1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。 醋酸100mL、 乙醇50mL 、H2O850mL 2.充分混合后使用。

　　17、凝膠固定液 (SDS-PAGE銀氨染色用) □組份濃度 50%(V/V)甲醇，10%(V/V)醋酸 □配制量 100L □配置方法 1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。 甲醇500mL 、醋酸 100mL 、H2O 400mL 2.均勻混合后室溫保存。

　　18、凝膠處理液 (SDS-PAGE銀氨染色用) □組份濃度 50%(V/V)甲醇，10%(V/V)戊二醛 □配制量 1L □配置方法 1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。 甲醇50mL 、 戊二醛 10mL 、H2O 40mL 2. 均勻混合后室溫保存。

　　19、凝膠染色液 (SDS-PAGE銀氨染色用) □組份濃度 0.4%(W/V)硝酸銀，1%(V/V)濃氨水，0.04%(W/V)氫氧化鈉 □配制量 100L □配置方法 1.量取下列試劑，加入100～200mL試劑瓶中。 20%硝酸銀 2mL 濃氨水 1mL 4%氫氧化鈉 1mL H2O 96mL 2.均勻混合。該溶液應為無色透明狀。如氨水濃度過低時溶液會呈現(xiàn)混濁狀，此時應補加濃氨水，直至透明。 3.本染色液應現(xiàn)用現(xiàn)配，不宜保存。

　　20、顯影液 (SDS-PAGE銀氨染色用) □組份濃度 0.005%(V/V)檸檬酸，0.02%(V/V)甲醛 □配制量 1L □配置方法 1.稱取下列試劑，置于1L試劑瓶中。 檸檬酸 50mg 甲醛 0.2mL 2.加入1L去離子水后，搖動混合后溶解。 3.室溫保存。

　　21、45%乙醇溶液 □組份濃度 45% □配制量 1L □配置方法 量取無水乙醇450mL，加入去離子水550mL，混勻。

　　22、5%的十二烷基硫酸鈉溶液 (W/V) □組份濃度 5% □配制量 0.1L □配置方法 稱取5.0g十二烷基硫酸鈉，溶于100mL4%的乙醇溶液中。

　　23、三氯甲烷-異戊醇混合試劑 □配置方法 取500mL三氯甲烷試劑，加入21mL異戊醇試劑，混勻。

　　24、1.6%乙醛溶液 □組份濃度 1.6% □配制量 0.1L □配置方法 取47%乙醛3.4mL，用去離子水定容至100mL。

　　25、二苯胺試劑 □配置方法 1.稱取二苯胺試劑0.8g，溶解于180mL冰乙酸中， 2.再加入8mL高氯酸混勻。 3. 臨用前加入0.8mL 1.6%乙醛溶液。 注意：配制完成后試劑應為無色。

　　26、15%三氯乙酸溶液 □組份濃度 15% □配制量 2L □配置方法 稱取三氯乙酸300g，用去離子水溶解定容至2000mL。

　　27、1%谷氨酸溶液 □組份濃度 1% □配制量 0.5L □配置方法 1.稱取5g谷氨酸，先用適量得用去離子水溶解。 2. 再用氫氧化鉀溶液中和至中性。 3. 最后用去離子水定容至0.5L。

　　28、1%丙酮酸溶液 □組份濃度 1% □配制量 0.5L □配置方法 1.稱取5g丙氨酸，先用適量得用去離子水溶解。 2. 再用氫氧化鉀溶液中和至中性。 3. 最后用去離子水定容至0.5L。

　　29、0.1%的碳酸氫鉀溶液 □組份濃度 0.1% □配制量 0.5L □配置方法 稱取碳酸氫鉀0.5g，用去離子水溶解定容至0.5L。

　　30、0.05%的碘乙酸溶液 □組份濃度 0.05% □配制量 0.25L □配置方法 稱取0.125g碘乙酸，用去離子水溶解定容至0.25L。

　　31、Locke氏溶液 □配制量 2L □配置方法 稱取18g氯化鈉，0.84g氯化鉀，0.48g氯化鈣，0.3g碳酸氫鈉，2g葡萄糖，用去離子水溶解定容至2000mL。

　　32、0.2mol/L的丁酸溶液 □組份濃度 0.2mol/L □配制量 1L □配置方法 1.量取18mL正丁酸試劑。 2.用1mol/L的氫氧化鈉中和。 3.再用去離子水定容至1L。

　　33、0.1mol/L的硫代硫酸鈉溶液 □組份濃度 0.1mol/L □配制量 10L □配置方法 稱248.17g硫代硫酸鈉，用去離子水溶解并定至10L。

　　34、0.1mol/L的碘溶液 □組份濃度 0.1mol/L □配制量 1L □配置方法 1.稱取碘12.7g和碘化鉀25g。 2.用去離子水溶解并定容至1L。 3.用0.1mol/L的硫代硫酸鈉標定。

　　35、10%氫氧化鈉溶液 □組份濃度 10% □配制量 2L □配置方法 稱取200g氫氧化鈉，用去離子水溶解并定容至2L。

　　36、10%鹽酸溶液 □組份濃度 10% □配制量 0.2L □配置方法 量取濃鹽酸49.3mL，用去離子水定至0.2mL。

　　37、0.1%標準丙氨酸溶液 □組份濃度 0.1% □配制量 0.5L □配置方法 稱取丙氨酸0.5g，用去離子水溶解并定容至0.5mL。

　　38、0.1%標準谷氨酸溶液 □組份濃度 0.1% □配制量 0.5L □配置方法 稱取谷氨酸0.5g，用去離子水溶解并定容至500mL。

　　39、0.1%水合茚三酮乙醇溶液 □組份濃度 0.1% □配制量 1L □配置方法 稱取1g水合茚三酮試劑，溶于1000mL無水乙醇中。

　　40、酚溶液 □配置方法 在大燒杯中加入80mL去離子水，再加入300g 苯酚，在水 浴中加熱攪拌、混合至苯酚完全溶解。將該溶液倒入盛有200mL去離子水的1000mL分液漏斗內(nèi)，輕輕振蕩混合，使其成為乳狀液。靜止7～10小時，乳狀液變成兩層透明溶液，下層為被水飽和的酚溶液，放出下層，貯存于棕色瓶中備用。

　　41、0.5%淀粉溶液 □組份濃度 0.5% □配制量 0.1L □配置方法 稱取淀粉0.5g，用去離子水溶解定容至0.1L。

　　42、對羥基聯(lián)苯試劑 □配置方法 稱取對羥基聯(lián)苯1.5g，溶于100mL0.5%氫氧化鈉溶液中，配制成1.5%的溶液。若對羥基聯(lián)苯顏色較深，應用丙酮或無水乙醇重結晶，放置時間較長后，會出項針狀結晶，應搖勻后使用。